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冰冻切片活性氧检测试剂盒(DHE探针)图片
产品货号:
HR9069
中文名称:
冰冻切片活性氧检测试剂盒(DHE探针)
英文名称:
Frozen section ROS detection kit(DHE probe)
产品规格:
100T|200T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒可以快速定性检测冰冻切片样本内活性氧(ROS)水平变化差异。在激发波长535nm,发射波长610nm附近,使用荧光显微镜/激光共聚焦检测红色荧光,从而测定样本内活性氧水平。

活性氧(ROS)包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。

冰冻切片活性氧检测试剂盒是一种利用荧光探针DHE进行活性氧检测的试剂盒。DHE是一种细胞膜通透性的荧光探针,被活性氧特异性氧化生成红色荧光物质,红色荧光强度与活性氧水平成正比,检测红色荧光就可知组织内活性氧的水平。

试剂盒组成:
组份200T400T
组份A:活性氧荧光探针DHE200μL200μL×2
组份B:10×清洗液B10mL20mL

保存条件:探针-20℃避光保存;清洗液2~8℃保存,有效期6个月。
·染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
·染色液A为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
·可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
·试剂拆封后请尽快使用完!

试剂盒特点:
1.使用方便:可用荧光显微镜直接观察;
2.背景低,灵敏度高;
3.线性范围宽,使用方便。

检测方法:
·荧光显微镜
·激光共聚焦显微镜

样本类型:新鲜冰冻切片

试剂盒以外自备试剂和仪器:
·荧光显微镜/激光共聚焦显微镜激发波长535nm,发射波长610nm。
· PBS/HBSS(无酚红)

使用注意事项:
·螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
·尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。
·对于某些样本,如果荧光太强,可以按照1:200~1:1000稀释探针。探针标记的时间也可以根据情况在20~60分钟内适当进行调整。
·以下操作步骤仅供参考,请根据实际样本情况调整。

使用方法:

一、试剂配制
1.根据样本数,用纯水将DHE探针100~200倍稀释,配成染色工作液。
2.用纯水将10×清洗液10倍稀释,配成1×清洗液工作液。

二、探针标记
1.准备待测的厚为10μm的未经固定处理的冰冻切片。
  必须使用新鲜组织(手术切除后1小时内)制成的冰冻切片。否则不新鲜的样本可能检测不到活性氧。
2.室温下,小心加上200μL清洗液工作液,铺满整个切片表面,静置3~5分钟。
3.小心吸除清洗液。
4.滴加100μL染色工作液,在37℃培养箱避光孵育20~60分钟。
  最好在湿盒中孵育,避免液体蒸发。
5.移除染色液。
6.用PBS洗涤切片2~3次。
7.加盖玻片或甘油封片。
8.荧光显微镜检测。
  ①染色完成后,立即进行荧光定性分析。
  ②激发波长535nm,发射波长610nm。
  ③荧光强,表明活性氧(ROS)含量高。
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